ATCC培養(yǎng)基是微生物培養(yǎng)中常用的標準化培養(yǎng)基，其操作需嚴格遵循規(guī)范，以確保實驗結(jié)果的準確性和可重復性。以下是操作時的關鍵注意事項：

　　一、培養(yǎng)基的選擇與配制

　　1.明確培養(yǎng)基類型

　　根據(jù)微生物種類和實驗目的選擇合適的ATCC培養(yǎng)基配方。

　　注意培養(yǎng)基的pH值、滲透壓和營養(yǎng)成分是否符合目標微生物的需求。

　　2.嚴格按配方配制

　　使用精確的電子天平稱量試劑，避免稱量誤差。

　　溶解試劑時充分攪拌，確保完*溶解。

　　調(diào)節(jié)pH值至規(guī)定范圍，避免過酸或過堿。

　　3.滅菌處理

　　液體培養(yǎng)基需高壓滅菌，固體培養(yǎng)基需先滅菌后倒平板。

　　滅菌后立即使用或在無菌條件下保存，避免污染。

　　二、ATCC培養(yǎng)基操作注意事項：

　　1.無菌操作

　　在超凈工作臺或生物安全柜中進行接種、倒平板等操作，避免雜菌污染。

　　使用無菌器械，每次使用前需灼燒滅菌。

　　操作過程中避免說話、咳嗽或大幅移動，減少空氣流動導致的污染。

　　2.接種規(guī)范

　　接種前確保微生物培養(yǎng)物處于對數(shù)生長期或適宜階段。

　　控制接種量，避免過量導致菌落重疊或過少導致生長不良。

　　涂布平板時用力均勻，確保菌液均勻分布。

　　3.培養(yǎng)條件控制

　　根據(jù)微生物需求設置溫度、氣體環(huán)境和濕度。

　　倒置培養(yǎng)平板，避免冷凝水滴落沖散菌落。

　　三、ATCC培養(yǎng)基儲存與有效期：

　　1.儲存條件

　　未開封的培養(yǎng)基應存放在陰涼干燥處，避免光照和高溫。

　　已配制的培養(yǎng)基需密封保存，防止吸潮或污染。

　　2.有效期管理

　　固體培養(yǎng)基平板應在4℃保存，最好在24~48小時內(nèi)使用，避免干燥或污染。

　　液體培養(yǎng)基開封后需盡快使用，避免變質(zhì)。

　　四、常見問題與解決

　　1.污染問題

　　若培養(yǎng)基出現(xiàn)霉菌、雜菌斑點，需檢查無菌操作是否規(guī)范，器械是否滅菌徹*。

　　定期清潔超凈工作臺和實驗區(qū)域，使用消毒劑（如70%乙醇）擦拭臺面。

　　2.菌落異常

　　菌落形態(tài)、大小不一致：可能因接種量不均或培養(yǎng)基pH偏差，需重新配制培養(yǎng)基并規(guī)范操作。

　　菌落稀少或無生長：檢查培養(yǎng)基配方、滅菌是否充分、微生物活性是否良好。

　　3.培養(yǎng)基干裂

　　固體培養(yǎng)基平板在長期培養(yǎng)后可能干裂，可通過加蓋保濕或縮短培養(yǎng)時間改善。